La esterilización por calor húmedo utiliza vapor, agua caliente o agua hirviendo para eliminar los microorganismos, siendo el método más eficaz el autoclave. Este proceso destruye los microorganismos por coagulación de sus proteínas celulares. 

• Usa vapor de agua a presión (121-134 °C).
• El calor se transfiere por convección y conducción.
• Eficaz para destruir esporas y bacterias en textiles, utensilios quirúrgicos, medios de cultivo.
• Ventajas: Rápido, eficaz, ecológico.
• Desventajas: No apto para plásticos o materiales sensibles al agua o calor.